Il kit AAV8 Titration ELISA è un test immunoenzimatico competitivo per la determinazione quantitativa delle particelle di AAV sierotipo 8 nei surnatanti delle colture cellulari e nei preparati virali purificati.
Descrizione del prodotto
Il kit REAGEN AAV8 Titration ELISA Test è un test immunoenzimatico competitivo per la determinazione quantitativa delle particelle di AAV sierotipo 8 in supernatanti di colture cellulari e preparazioni virali purificate.
I virus adeno-associati (AAV) sono virus ssDNA non patogeni, oggetto di intensi studi come vettori virali per la terapia genica. Il virus trasduce una varietà di cellule in divisione e non in divisione, mostrando un'espressione genica a lungo termine con una bassa risposta immunitaria cellulare. L'AAV è stato utilizzato in diversi studi clinici (ad esempio FIX, CFTR, Parkinson, malattia di Canavan) senza gravi effetti avversi legati al vettore. I metodi per la caratterizzazione delle preparazioni di AAV attualmente includono l'ELISA di titolazione, la qPCR, la ddPCR, il DNA dot blot, la determinazione delle unità di trasduzione, il saggio del centro infettivo, l'SDS-PAGE o la microscopia elettronica. L'immunotitolazione mediante l'ELISA di titolazione AAV8 di REAGEN offre un metodo rapido, sensibile e riproducibile per la titolazione di virioni AAV8 wild-type intatti, di virioni AAV8 ricombinanti o di capside AAV8 vuoti assemblati e intatti.
Panoramica della procedura
REAGEN Il test si basa sulla tecnica ELISA a sandwich. Un anticorpo monoclonale specifico per un epitopo conformazionale sui capside AAV8 assemblati viene spalmato su strisce di una piastra di microtitolazione, le particelle AAV catturate vengono rilevate in due fasi:
Un altro anticorpo anti-AAV8 è stato utilizzato come anticorpo di rilevazione.
Un anticorpo secondario anti-IgG Fc umane reagisce con l'immunocomplesso.
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