Si misura in base alla capacità di idrolizzare il gruppo 5'-fosfato dal substrato adenosina-5'-monofosfato (AMP). Il prodotto ortofosfato viene misurato con un kit di rilevamento del verde malachite. L'attività specifica è >12.500 pmol/min/μg, misurata nelle condizioni descritte.
Sequenza N-terminale
Analisi - Trp27
Massa molecolare prevista - 85 kDa
SDS-PAGE - 84-93 kDa in condizioni riducenti.
Senza vettore
Che cosa significa CF?
CF è l'acronimo di Carrier Free (CF). In genere aggiungiamo l'albumina di siero bovino (BSA) come proteina carrier alle nostre proteine ricombinanti. L'aggiunta di una proteina carrier migliora la stabilità della proteina, aumenta la durata di conservazione e consente di conservare la proteina ricombinante a una concentrazione più diluita. La versione senza carrier non contiene BSA.
Qual è la formulazione giusta per me?
In generale, consigliamo di acquistare la proteina ricombinante con BSA per l'uso in colture cellulari o tissutali, o come standard ELISA. La proteina senza carrier è invece consigliata per applicazioni in cui la presenza di BSA potrebbe interferire.
Procedura di dosaggio
Materiali
Tampone di dosaggio: 25 mM Tris, 5 mM MgCl2, pH 7,5
Chimera 5'-Nucleotidasi/CD73 Fc ricombinante umana (rhCD73/mFc)
Substrato: Adenosina monofosfato (AMP), 5 mM di stock in acqua deionizzata
Kit per il rilevamento del fosfato verde malachite
piastra trasparente a 96 pozzetti
Lettore di piastre con capacità di lettura dell'assorbanza
Preparare una curva standard dallo standard di fosfato 1 M aggiungendo 10 µL di standard di fosfato 1 M a 990 µL di tampone di dosaggio per una riserva di 10 mM. Continuare aggiungendo 10 µL dello stock di fosfato 10 mM a 990 µL di tampone di dosaggio per uno stock di 100 µM (questa è la prima diluizione da usare come standard).
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