Il Reagente RNA-Solv® è un sistema a un solo reagente per l'isolamento dell'RNA totale da cellule e tessuti. Il reagente, una soluzione monofase composta da fenolo e isotiocianato di guanidina, è una modifica del metodo di isolamento dell'RNA in un unico passaggio sviluppato da Chomczynski e Sacchi (1). Il campione viene omogeneizzato e lisato in RNA-Solv® Reagent che mantiene l'integrità dell'RNA, interrompendo e denaturando le RNasi endogene e altri componenti cellulari. L'estrazione del lisato con cloroformio denatura ulteriormente le proteine e separa la miscela in una fase organica e una acquosa. L'RNA rimane esclusivamente nella fase acquosa e viene successivamente recuperato con isopropanolo.
Questo metodo è adatto a un'ampia gamma di materiali di partenza: fino a 1 g di tessuto o 1 x 108 cellule di origine umana, animale, vegetale o batterica. La semplicità del metodo RNA-Solv® Reagent consente l'elaborazione simultanea di un gran numero di campioni. L'intera procedura può essere completata in un'ora. L'RNA totale preparato può essere utilizzato per l'analisi Northern blot, l'ibridazione dot blot, la selezione poli(A)+, la traduzione in vitro, il saggio di protezione RNasi e il clonaggio molecolare. Per l'uso nell'amplificazione mediante cicli termici, si raccomanda il trattamento dell'RNA isolato con DNasi I priva di RNasi quando i due amplificatori si trovano all'interno di un singolo esone.
Specifiche tecniche
Solo per uso di ricerca. Non per l'uso in procedure diagnostiche.
CARATTERISTICHE TECNICHE
Volume 100 mL, 200 mL
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