Soluzione di preparazione delle librerie MPS basata sul complemento inverso (RC-PCR) per l'analisi di regioni ipervariabili (hotspot di mutazione) in quantità molto basse di mtDNA nucleare (altamente degradato) in campioni complessi che non forniscono un STR completo. Per i laboratori dei Paesi in cui il sequenziamento del genoma completo in ambito forense è limitato da linee guida o normative.
La RC-PCR consente l'amplificazione multipla mirata, l'indicizzazione del sequenziamento e l'aggiunta di adattatori che avvengono simultaneamente in una singola reazione in provetta chiusa.
Compatibilità
Tutti gli ampliconi sono progettati per soddisfare le lunghezze dei frammenti più brevi possibili e sono compatibili con i sistemi illumina® MiSeq™, con letture 2x 10 bp Unique Dual Index.
I kit IDseek® sono stati testati con acido tannico e acido umico. La tecnologia RC-PCR consente l'analisi affidabile di campioni altamente degradati che si trovano frequentemente nei casi forensi.
Librerie pronte per le sequenze
IDseek® comprende una soluzione completa di reagenti e materiali di consumo necessari per generare librerie MPS pronte per la sequenza per applicazioni forensi: dall'indicizzazione all'amplificazione, alla pulizia della libreria magnetica e alla selezione delle dimensioni.
Componenti IDseek
Reagenti e materiali di consumo IDseek® necessari per 96 reazioni:
- Miscela di sonde RC-PCR
- RC-PCR HiFi 2x Hotstart PCR Mastermix
- 2x Piastre di Primer Unique Index disidratate e pre-macchiate
- AmpliClean™ Cleanup, microsfere magnetiche
Per l'uso di AmpliClean™ Magnetic Bead Cleanup si consiglia di utilizzare un magnete compatibile con provette da centrifuga da 1,5 mL/2,0 mL.
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