Questo kit è utilizzato per la rilevazione qualitativa dell'acido nucleico di nuovi coronavirus in tamponi nasofaringei, tamponi orofaringei (gola), tamponi nasali anteriori, tamponi medio-turbinati, lavaggi nasali e aspirati nasali di individui che sono sospettati di COVID19 dal loro operatore sanitario. La rilevazione dei geni ORF1ab e N del nuovo coronavirus può essere utilizzata per la diagnosi ausiliaria e il monitoraggio epidemiologico della nuova infezione da coronavirus.
Questo kit è stato progettato con sonde TaqMan e primer specifici per le sequenze ORF1ab e N del nuovo coronavirus (SARS-Cov-2). La soluzione di reazione PCR contiene 3 set di primer specifici e sonde fluorescenti per la rilevazione specifica dei target, mentre un ulteriore set di primer specifici e sonde fluorescenti viene utilizzato come controllo standard interno del kit per la rilevazione dei geni housekeeping endogeni.
Il principio del test è che la sonda fluorescente specifica viene digerita e degradata dall'attività esonucleasica dell'enzima Taq nella reazione di PCR, in modo da separare il gruppo fluorescente reporter e il gruppo fluorescente quenched, in modo che il sistema di monitoraggio della fluorescenza possa ricevere un segnale fluorescente; quindi, attraverso l'effetto di arricchimento dell'amplificazione della PCR, il segnale di fluorescenza della sonda raggiunge un valore soglia-Ct stabilito (soglia di ciclo). In assenza di ampliconi target, il gruppo reporter della sonda è vicino al gruppo quenching.
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