L'endonucleasi T7 I riconosce e taglia il DNA non perfettamente appaiato, le strutture cruciformi del DNA, le strutture o giunzioni di Holliday, il DNA eteroduplex e, più lentamente, il DNA a doppio filamento intaccato. Il sito di clivaggio è il primo, il secondo o il terzo legame fosfodiestere che si trova a 5´ dal mismatch.
Introduzione
L'endonucleasi Magigen T7 può essere utilizzata per rilevare mutazioni geniche, SNP, mutanti TALEN o CRISPR / cas9, identificare DNA non corrispondenti e risolvere DNA incrociati a quattro vie o ramificati. Rilevamento di eteroduplex o scissione del DNA; è utilizzata per tagliare in modo casuale il DNA lineare per la clonazione shot gun, ecc.
Unità Definizione
La quantità di enzima necessaria per convertire pUC (AT)* di una struttura a croce superelastica del 90% o più in una struttura lineare di oltre il 90% in un sistema di reazione di 50 μl a 37°C per 1 ora è definita come un'unità di attività.
Caratteristiche del prodotto
L'endonucleasi I T7 è un enzima selettivo per la struttura del substrato che presenta attività di clivaggio diverse per diversi substrati di DNA. Pertanto, quando si taglia un substrato specifico, è necessario esplorare e controllare la quantità di enzima e il tempo di reazione.
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