La DNA polimerasi di Taq è una polimerasi di DNA ricombinante termostabile derivata dal aquaticus termofilo di Thermus del batterio. Il suo peso molecolare è kDa 94. La DNA polimerasi di Taq può amplificare l'obiettivo del DNA fino a 5 KB (modello semplice). La velocità dell'allungamento è 2kb/min (70~75°C). Ha 5' a 3' attività della polimerasi ma manca di di 3' a 5' attività di exonuclease che provoca un 3' - il dA sporge il prodotto di PCR.
Definizione dell'unità
Un'unità è definita come la quantità dell'enzima richiesto per catalizzare l'incorporazione di nmole 10 dei dNTPs in una forma insolubile in acido in 30 minuti a 70°C facendo uso del DNA hering dello sperma come substrato.
Amplificatore di stoccaggio
Tris-HCl di 20mM (pH 8,0), KCl di 100mM, MgCl2 di 3.2mM, 1mM DTT, 0,1% Tritoni X-100, 0,1% Tween20, 0.2mg/ml BSA, 50% (V/V) glicerolo.
amplificatoredi PCR di 10× senza mg2+
Tris-HCl di 100mM (pH 8,8), KCl di 500mM, 1% Tritone X-100.
Applicazioni
• Amplificazione di PCR delle sequenze di DNA finchè 5 KB
• Etichettatura del DNA
• Ordinamento del DNA
• PCR per clonare
Concentrazione: 5U/μl
Indici:
DNA polimerasi di Taq - μl 100
Amplificatore di PCR 10× (mg2+ libero) - 1,25 ml
Amplificatore di caricamento 6× - 1 ml
MgCl2 di 25mM - 1,25 ml
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