Mu-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus) genera filamenti di DNA complementare partendo preferibilmente da RNA a singolo filamento in presenza di un primer o da un ibrido RNA-DNA. La trascrittasi inversa di Mu-MLV ha un'attività RNasi H inferiore a quella della trascrittasi inversa di AMV, il che rappresenta un vantaggio quando si sintetizzano cDNA da mRNA lunghi. Mu-MLV non possiede l'attività esonucleasica 3' ' 5'. Si raccomanda di utilizzare 10 U/µg di RNA per una trascrizione inversa ottimale.
Applicazioni
Questo enzima è particolarmente indicato per la produzione di lunghi frammenti di cDNA, ad esempio per la generazione di librerie di cDNA o per la sintesi di cDNA first strand prima della RT-PCR.
Specifiche tecniche
Confezione
Componenti del kit
Una provetta (200 µL) di trascrittasi inversa Mu-MLV 40000 unità (200U/µl) 5 provette di tampone per cDNA (tappo trasparente) 250 mM Tris-HCl (pH 8,3), 375 mM KCl, 50 mM DTT, 15 mM MgCl2
Quantità e purezza
Concentrazione -
200 U/µ
Attività
Tipo di templato -
RNA
Definizione di unità -
Un'unità è la quantità di enzima che incorpora 1 nmole di dTTP in forma acida - insolubile in 10 minuti a 37 °C utilizzando come substrato polyA-oligodT 12-18.
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