Il kit di estrazione di RNA/DNA virale da tampone/saliva è adatto per l'estrazione rapida di acidi nucleici virali di elevata purezza da plasma, siero, tampone nasofaringeo, espettorato, liquido di lavaggio broncoalveolare, ascite, surnatante di coltura cellulare e urina. Questo kit si basa sul metodo di purificazione su colonna di gel di silice. Il campione viene omogeneizzato nel tampone di lisi e gli acidi nucleici vengono rilasciati nel tampone. Il tampone di lisi contiene un'alta concentrazione di guanidina. In queste condizioni, la membrana assorbe gli acidi nucleici mediante legami idrogeno e interazioni elettrostatiche, mentre le proteine e le altre impurità non vengono assorbite. Il lisato viene trasferito alla colonna di adsorbimento per la filtrazione e la membrana filtrante contenente gli acidi nucleici viene lavata per rimuovere le proteine residue e altre impurità; infine, gli acidi nucleici vengono eluiti dalla soluzione tampone a basso contenuto di sale. Gli acidi nucleici ottenuti possono essere utilizzati direttamente in esperimenti a valle, come trascrizione inversa, PCR, RT-PCR, PCR quantitativa a fluorescenza, sequenziamento di nuova generazione e Northern blotting.
Componenti principali
Il kit è costituito dai seguenti componenti:
50 mL di tampone di lisi Fornisce un ambiente per la lisazione e il legame con la colonna
24 mL di tampone di lavaggio Rimuove le proteine residue e altre impurità
6 mL Tampone di eluizione Soluzione priva di nucleasi
100 pz Colonne Spin Assorbe gli acidi nucleici virali
100 pz Tubi di raccolta Utilizzati per la raccolta degli acidi nucleici eluiti
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