Sonicatore per biologia molecolare Bioruptor® Plus

per frammentazione di DNAper frammentazione di RNA

Il Bioruptor® utilizza un sistema unico per processare in modo uniforme campioni multipli in provette sigillate con capacità da 0,5 ml a 50 ml. Il sistema di raffreddamento incorporato (raffreddatore ad acqua e valvola a ciclo singolo) garantisce un controllo della temperatura di alta precisione, con il risultato di campioni di qualità superiore. È un dispositivo eccellente per il taglio della cromatina, la disgregazione di cellule e tessuti e molte altre applicazioni (vedi sotto). Per accelerare la fenotipizzazione su larga scala della differenza di numero di pollini all'interno della famiglia Arabidopsis, abbiamo modificato un metodo esistente più adatto al nostro scopo di conteggio dei pollini utilizzando un Bioruptor®. Abbiamo coltivato quattro piante per genotipo. Tre boccioli di fiori per pianta sono stati raccolti ed essiccati a 65°C per una notte. Abbiamo raccolto boccioli di fiori con polline maturo, ma prima che le antere fossero aperte (stadio floreale 13). Non abbiamo utilizzato il primo e il secondo fiore dell'infiorescenza, poiché tendono a mostrare morfologie floreali immature. 30 μl di Tween-20 al 5% vengono aggiunti al fiore essiccato e i campioni vengono sonicati utilizzando il Bioruptor® Plus con modalità ad alta potenza per 10 cicli (ciclo di sonicazione: 30 sec ON, 30 sec OFF) per separare i grani di polline dalle antere. Quindi, tutte le soluzioni polliniche vengono misurate con un contatore di cellule.