Il kit Muse® Multi-Color DNA Damage - 50 test (numero di parte: MCH200107) è stato progettato per consentire ai ricercatori di disporre di un metodo rapido e semplice per rilevare l'attivazione di ATM e H2A.X utilizzando l'analizzatore cellulare Muse® di Guava®. Il kit è stato ottimizzato utilizzando come sistema modello un reagente che danneggia il DNA, l'etoposide, su cellule HeLa, ma può essere utilizzato con altre linee cellulari umane per studiare i fattori fisici e chimici che possono indurre una risposta al danno al DNA attraverso la via di segnalazione ATM-dipendente. I dati generati con il sistema Muse forniscono valori statistici, misurando la:
Percentuale di cellule negative (es. nessun danno al DNA)
Percentuale di cellule attivate da ATM
Percentuale di cellule attivate da H2A.X
Percentuale di rotture del DNA a doppio filamento (doppia attivazione di ATM e H2A.X)
Il kit Muse Multi-Color DNA Damage comprende due anticorpi coniugati direttamente: un anticorpo fosfo-specifico per ATM (Ser1981)-PE e un anticorpo fosfo-specifico per l'istone H2A.X coniugato con PECy5 per misurare l'entità del danno al DNA nei campioni in esame. Questo kit bicolore è stato progettato per rilevare lo stato di fosforilazione di ATM e dell'istone H2A.X simultaneamente mediante analisi in flusso. L'analisi bicolore dell'attivazione di ATM e dell'istone H2A.X in multiplex fornisce un metodo di rilevamento più affidabile per valutare la via di segnalazione del danno al DNA. Questa coppia di anticorpi fornisce uno strumento sensibile e prezioso per studiare i fattori che inducono il danno al DNA e influenzano la riparazione del DNA, consentendo di esplorare la relazione tra il danno al DNA, i checkpoint del ciclo cellulare e l'avvio dell'apoptosi.
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