pOnebyOne™ sono kit di espressione bicistronici per mammiferi estremamente efficienti, accurati e flessibili che contengono una cassetta di espressione basata sulla tecnologia Breakthrough della sequenza 2A. La cassetta di espressione di pOnebyOne™ I (con resistenza alla neomicina) incorpora il promotore precoce del citomegalovirus che precede la sequenza 2A in frame con il recettore troncato del fattore di crescita nervoso (ΔNGFR). ΔNGFR è una soluzione completa per selezionare i cloni positivi. Può essere visualizzato mediante citometria utilizzando un anticorpo specifico marcato con FITC o simili e può essere arricchito dai cloni negativi con microsfere magnetiche contenenti un anticorpo anti-ΔNGFR.
Vantaggi e caratteristiche
Soluzione completa: un vettore di clonazione direzionale per clonare e produrre una proteina di interesse.
Tecnologia innovativa: basata sull'espressione simultanea in sequenza 2A di due proteine in cellule di mammifero (una proteina di interesse e un reporter).
Altamente efficiente: sistema di clonazione testato con inserti fino a 4 kb.
Processo di clonazione che consente di risparmiare tempo: vettore linearizzato pronto per la miscelazione con il frammento di PCR.
Facile da usare: facilita la selezione di cellule positive che esprimono il gene ricombinante di interesse.
Riduzione dei costi: evita l'uso di enzimi di restrizione.
Accurato: prestazioni comprovate per le linee cellulari più comuni.
Flessibile: consente la trasfezione in linee cellulari difficili.
Fondo sperimentale veramente basso: inferiore all'1%.
Conveniente: disponibile con diverse cassette di marcatori di resistenza.
Clonazione direzionale: PCR con il gene di interesse.
Controllo del reporter: quantità stechiometrica della proteina di interesse e di una proteina reporter.
Senza rischi: prodotto coperto dalla nostra garanzia di qualità al 100%.
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