RNzol LS Reagente
----Campione di sangue/liquido Kit di estrazione RNA totale (colonna vertebrale)
Descrizione
RNzol LS Reagent è un reagente pronto all'uso per l'isolamento dell'RNA totale dal sangue intero e da altri campioni liquidi. Il reagente, una soluzione monofasica di fenolo e guanidina è otiocianato, è un miglioramento del metodo di isolamento dell'RNA in un solo passaggio sviluppato da Chomczynski e Sacchi. Durante l'omogeneizzazione del campione o lisi, RNzol LS Reagent mantiene l'integrità dell'RNA, mentre le cellule di disturbo e componenti cellulari di dissoluzione. Aggiunta di cloroformio seguita da centrifugazione separa la soluzione in una fase acquosa e una fase organica. L'RNA rimane esclusivamente in fase acquosa. Dopo il trasferimento della fase acquosa, l'RNA viene recuperato per precipitazione con alcool isopropilico. Dopo la rimozione della fase acquosa, il DNA e le proteine nel campione possono essere recuperati per precipitazione sequenziale.
L'RNA totale isolato da RNzol LS Reagent è privo di proteine e di contaminazione del DNA. Può essere utilizzato per l'analisi Northern blot, l'ibridazione dot blot, la selezione poli(A)+, la traduzione in vitro, il test di protezione RNase e la clonazione molecolare. Per l'uso nella reazione a catena della polimerasi (PCR), il trattamento dell'RNA isolato con grado di amplificazione DNasi I è raccomandato quando i due primer si trovano all'interno di un singolo esone.
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