Reagente colorante

di parassitologia

Questa colorazione è utile per l'individuazione di trofozoiti mobili di Entamoeba ARANCIO DI ACRIDINA (TAMPONE ACETATO) L'aggiunta di arancio di acridina a un concentrato fecale mette in evidenza le barre cromidiche di Entamoeba coli, Entamoeba histolytica/dispar ed Entamoeba hartmanni, che si colorano di verde brillante. AURAMINA FENOLO (LEMPERT) Metodo 1. Effettuare strisci fecali come per lo ZN e fissarli in metanolo. 2. Colorare con auramina-fenolo (Lemperts) per 10-15 minuti. 3. Sciacquare accuratamente con acqua di rubinetto. 4. Decolorare con alcool acido (come per ZN). 5. Risciacquare accuratamente con acqua di rubinetto. 6. Controcolorare con permanganato di potassio allo 0,1% per 30 secondi. 7. Risciacquare accuratamente con acqua di rubinetto e lasciare asciugare all'aria. Non asciugare, molte marche di carta assorbente sono fluorescenti! Le oocisti appaiono come dischi di colore giallo brillante su uno sfondo scuro. SOLUZIONE A E SOLUZIONE B DELLA COLORAZIONE DI FIELD N.B. Entrambe le soluzioni sono pronte all'uso e non devono essere diluite. Questa tecnica è un metodo rapido di colorazione di Field's, che consente di colorare rapidamente film sottili fissati di vari campioni clinici. Questo metodo particolare è molto utile per la colorazione di pellicole di feci non formate, essudati fecali, aspirati duodenali ecc. Metodo 1. Preparare un film sottile di feci/essudato e lasciarlo asciugare. 2. Fissare in metanolo per 1 minuto. 3. Inondare il vetrino con 1 ml di colorante di Field's B. 4. Aggiungere immediatamente un volume uguale di colorante di Field's A, mescolare bene sul vetrino e lasciare colorare per 1 minuto. 5. Sciacquare bene con acqua di rubinetto e asciugare. 6. Esaminare la pellicola utilizzando l'obiettivo a immersione in olio e l'olio per immersione Risultati Nuclei dei parassiti e strutture contenenti cromatina - rosso Citoplasma - grigio-bluastro Nuclei di leucociti - viola Lieviti e batteri - blu scuro